Test name: CISH/FISH
Test cost: 39,792,080 Rial
Status of test presentation: Existing
Sample type:
بلوک پارافینه
Sample storage:
بلوک پارافینه در بسته بندی مناسب در دمای اتاق
Sample shipping:
دمای اتاق
Clinical information:
در تکنیک FISH اسید های نوکلئیک تک رشته ای (معمولا DNA و گاهی اوقات RNA) با یکدیگر برهمکنش داده می شوند به طوری که کمپلکس ها یا هیبرید هایی را با ایجاد مولکول هایی با تشابه زیاد یا توالی های مکمل را تشکیل دهند. پس از هیبریداسیون اسید های نوکلئیک، میزان همسانی توالی ها تعیین می شود. در نتیجه، توالی های خاص شناسایی شده و روی کروموزوم های خاص مکان یابی می شوندتست Chromogenic in situ hybridization CISH یا FISH تكنيك هيبريدسازي در محل یا ISH به عملي اطلاق مي شود كه در آن يك قطعه DNA يا RNA نشان دار تك رشته اي بعنوان پروب با قسمتي از DNA تك رشته اي سلول بعنوان هدف با تشكيل جفت باز اتصال پيدا مي كند. واضح است كه پروب از نظر توالي بايد مكمل توالي هدف باشد.عمل هيبريدسازي در محل مي تواند در محيط مايع و يا در محيط جامد انجام گيرد و نشان موجود در پروب ها مي تواند آنزيم هاي توليدكننده رنگ (Chromogenic) و يا تركيبات فلورسانت (Fluorescent) باشند. اگر عمل هيبريدسازي درمحل در داخل سلولهاي نمونه يعني در محل واقعي هدف انجام شود، هيبريدسازي در محل اصلي يا In situ Hybridization يا ISH ناميده مي شود. پس تكنيك هاي CISH و FISH اختلافشان در سيگنال هائي است كه توليد ميكنند. در CISH سيگنال توليد رنگ است كه در زير ميكروسكوپ نوری معمولی (Bright- field) مشاهده مي شود اما در FISH سيگنال نهائي توليد فلورسانس است كه با ميكروسكوپ فلورسانس و به كمك فيلترهاي مخصوص و دوربين عكسبرداري قابل بررسي میباشد با يك مقايسه، خيلي زود معلوم مي شود كه تكنيك FISH نسبت به CISH احتياج به ابزار بيشتري دارد و هزينه انجام آن نيز بيشتر خواهد بود.در تكنيك CISH عمل هيبرسازي در داخل سلولها يا بافت فيكس شده با فرمالين و غوطه ور در پارافين (FFPE) انجام مي گيرد. با استفاده از اين تكنيك بررسي هاي زير را مي توان روي نمونه انجام داد:Gene amplificationGene DeletionChromosome TranslocationChromosome numberبيشترين مزيت CISH توانائي تكنيك در ارزيابي همزمان تغييرات ژنتيك و مورفولوژي بافت است. نتايج حاصل از اين روش بصورت كمي و قابل نگهداري در آرشيو آزمايشگاه است.معمول ترین كاربرد روش CISH در آزمايشگاه هاي تشخيص طبي در ايران بررسي تغييرات ژنتيك پروتو انكوژن HER-2/neu يا C-erb B-2 در سرطان پستان است و قابل اعتمادترين روش بررسي تغييرات اين ژن در سرطان پستان خواهد بود. ژن Her-2 در بازوي بلند كروموزوم 17 قرار دارد و رسپتوري راكد مي كند كه يك رسپتور- تيروزين كيناز (RTK)بوده و در مسير انتقال پيام سلول هاي اپيتليوم پستان عمل ميكند.
Name of measurement method:
فلورسانس در هیبریداسیون درجا (FISH)کروموژنیک در هیبریداسیون درجا (CISH)
Cases of non-acceptance of samples:
فقدان هویتبلوک شکسته
Additional information:
چند سالی است که CISH به عنوان یک جایگزین بالقوه برای FISH برای تایید نتایج مبهم IHC به وجود آمده است. پایــه و اســاس تکنیک CISH مشــابه FISH اســت ولی دارای ویژگـیهـائی اسـت كـه در FISH وجـود نـدارد. در CISH از پروبهای DNA استفاده میشود، ولی نتایج از طریـق واكـنش آنزیماتیك كه سبب تولید رنگ میشـود (مثـل IHC) بررسـی می شود و نتایج را می توان با سرعت بیشتر و با استفاده از وسایل ارزانتر (میكروسكوپ نوری) بررسی كرد. علاوه بر آن، بر خلاف FISH ، در CISH امكان بررسـی بافـت شناسـی وجـود دارد و اسلایدها را میتوان برای مدت زمان طـولانی در دمای اتاق بایگـانی كـرد چون سیگنال های CISH با گذشت زمان از بین نمی روند .