Test cost: 261,410 Rial

Status of test presentation: Existing

Sample type:

خون کامل EDTA

Sample size:

2 ml

 

The smallest sample size:

0.5ml

Sample storage:

24 ساعت دمای محیط 48 ساعت دمای یخچال

Sample shipping:

 رعایت زنجیره سرد (8-2 در جه)

Necessary information about the patient:

سن بيمار

Necessary preparation before sampling:

به آمادگی خاصی نیاز ندارد

Clinical information:

رتیکولوسیت ها گلبول های قرمز خون نسبتا نابالغ تازه تولید شده هستند. شمارش رتیکولوسیت ها به تعیین تعداد و/یا درصد رتیکولوسیت ها در خون کمک می کند و بازتابی از عملکرد یا فعالیت اخیر مغز استخوان است.

گلبول‌های قرمز خون در مغز استخوان تولید می‌شوند، جایی که سلول‌های بنیادی خونساز تمایز یافته و رشد می‌کنند، در نهایت رتیکولوسیت‌ها را تشکیل می‌دهند و در نهایت به گلبول‌های قرمز بالغ تبدیل می‌شوند. رتیکولوسیت ها از نظر بصری کمی بزرگتر از گلبول های قرمز بالغ هستند.

برخلاف اکثر سلول‌های دیگر بدن، گلبول‌های قرمز بالغ هسته ندارند، اما رتیکولوسیت‌ها هنوز مقداری ماده ژنتیکی باقی‌مانده (RNA) دارند. همانطور که رتیکولوسیت ها بالغ می شوند، آخرین RNA باقیمانده را از دست می دهند و اکثر آنها در عرض یک روز پس از آزاد شدن از مغز استخوان در خون، به طور کامل رشد می کنند. تعداد یا درصد رتیکولوسیت ها شاخص خوبی از توانایی مغز استخوان فرد برای تولید گلبول های قرمز خون (اریتروپویزیس) کافی است. رتیکولوسیت ها بزرگتر و نامنظم تر از گلبول های قرمز بالغ هستند. آنها همچنین دارای سرعت متابولیسم بالاتری هستند و بنابراین قادر به تولید ATP کارآمدتر هستند.

Name of measurement method:

رنگ آميزي حياتي

Similar names:

• Retic Count
• Reticulocyte Percent
• Reticulocyte Index
• Corrected Reticulocyte
• Reticulocyte Production Index
• RPI
• Reticulocyte Count

Sample requirements:

نام و نام خانوادگي، نوع نمونه

Intervening factors:

• بارداری ممکن است باعث افزایش تعداد رتیکولوسیت ها شود.
• اجسام هاول-جولی ماده ای آبی رنگ در RBC هستند که در کم خونی شدید یا کم خونی همولیتیک رخ می دهد. گلبول های قرمز حاوی این اجسام هاول-جولی شبیه رتیکولوسیت هستند و می توانند توسط برخی از ماشین های شمارنده خودکار به عنوان رتیکولوسیت به اشتباه شمارش شوند. این تعداد کاذب بالایی از رتیکولوسیت ها را می دهد.
• همولیز نمونه ممکن است نتایج آزمایش را تغییر دهد.
• ممکن است پس از تزریق خون، مقادیر کاذب کاهش یابد.
• همودیلوشن نمونه آزمایش، به دلیل خونگیری از بازویی که IV در آن تزریق می شود، ممکن است نتایج آزمایش را تغییر دهد.
• دارویی که ممکن است نتیجه آزمایش را افزایش دهد: اپوئتین آلفا
• داروهایی که ممکن است نتیجه آزمایش را کاهش دهند: AZT، شیمی درمانی، کلرامفنیکل

 

Cases of non-acceptance of samples:

همولیز

لخته

Additional information:

نحوه انجام شمارش رتیکولوسیت دستی:

• خون کامل EDTA دار با یکی از رنگ های حیاتی مانند نیومتیلن بلو (New methylene blue) یا بریلیانت کرزیل بلو (Brilliant cresyl blue) مخلوط می شود.
• برای تهیه این رنگ ها، یک گرم از آن ها را در ۱۰۰ میلی لیتر بافر فسفاته (PBS) با pH=7/4 حل کرده و در ظروف تیره و در دمای یخچال نگهداری کنید. رنگ ساخته شده در دمای یخچال به مدت یک ماه قابل نگهداری است. دقت شود که قبل از استفاده از رنگ، آن را بوسیله کاغذ واتمن شماره یک، فیلتر کنید.
• حجم های مساوی از خون را با یکی از رنگ های حیاتی مخلوط کرده و به مدت ۲۰ دقیقه در دمای اتاق انکوبه کنید. رنگ های حیاتی با عبور از غشاء گلبول های قرمز در حالت زنده، روی ریبوزوم ها و رشته های RNA موجود در رتیکولوسیت ها رسوب کرده و آن ها را به رنگ آبی سیر بصورت رسوبی از گرانول یا فیلامنت، قابل مشاهده می سازد.
• دو لام تهیه کرده و پس از خشک شدن، با استفاده از عدسی روغنی، به شمارش رتیکولوسیت ها در مناطقی که پخش یکنواختی از سلول ها وجود دارد، می پردازیم. گلبول های قرمز آبی کمرنگ یا آبی متمایل به سبز و رتیکولوسیت ها آبی کمرنگ به همراه موارد رشته ای یا گرانولار به رنگ آبی تیره دیده می شوند.
• حداقل ۱۰۰۰ گلبول (گلبول قرمز و رتیکولوسیت) شمارش می شود و سپس درصد رتیکولوسیت ها را محاسبه می کنیم. برای مثال اگر ۱۵ رتیکولوسیت در بین ۱۰۰۰ گلبول شمارش شوند، شمارش رتیکولوسیت ۱/۵ درصد خواهد بود. برای افزایش دقت، فرد دیگری، اسلاید دیگری از همان بیمار را بررسی کند که اختلاف جواب ها در محدوده ۲۰ درصد قابل قبول خواهد بود.

فرمول محاسبه تعداد رتیکولوسیت ها به صورت زیر است:

تعداد رتیکولوسیت = (تعداد رتیکولوسیت ها / تعداد گلبول های قرمز شمارش شده)  * 100

از آنجایی که تعداد رتیکولوسیت ها درصدی از تعداد کل گلبول های قرمز است، تعداد نرمال تا کم رتیکولوسیت ها می تواند در بیمار کم خون زیاد ظاهر شود، زیرا تعداد کل گلبول های قرمز بالغ کم است. برای تعیین اینکه آیا شمارش رتیکولوسیت ها نشان دهنده پاسخ گلبول های قرمز مناسب (مغز گلبول قرمز) در بیماران مبتلا به کم خونی و کاهش هماتوکریت است، شاخص های رتیکولوسیت به صورت زیر محاسبه می شود:

مقادیر طبیعی برای تعداد رتیکولوسیت ها بسته به سن، جنس و عوامل دیگر متفاوت است. به طور کلی، تعداد رتیکولوسیت ها بالاتر از محدوده طبیعی نشان دهنده افزایش تولید RBC است، در حالی که تعداد رتیکولوسیت های کم ممکن است نشان دهنده کاهش تولید یا تخریب RBC باشد.

• رتیکولوسیت ها با رنگ رایت یا گیمسا به راحتی قابل مشاهده نیستند.
• رتیکولوسیت ها به عنوان گلبول های قرمز نابالغ در اسمیر خون محیطی شناخته می شوند.
• رتیکولوسیت ها به رنگ های حیاتی خاصی مانند رنگ های نیو متیلن بلو، کرزیل بلو یا آزور B نیاز دارند.
• رتیکولوسیت ها بزرگتر از گلبول های قرمز طبیعی هستند و ممکن است به عنوان ماکروسیت شناخته شوند. هنگامی که به تعداد کافی وجود داشته باشد، ممکن است باعث افزایش MCV شود.
• برخلاف گلبول های قرمز نارنجی، رتیکولوسیت ها در لکه های رایت خاکستری یا آبی-خاکستری به نظر می رسند. این وضعیت پلی کروماتوفیلی نامیده می شود.

Answer time: 1 day