Test cost: 35,803,000 Rial

Status of test presentation: Existing

Clinical information:

روش MLPA یکی از جدیدترین تکنیک های سیتوژنتیک مولکولی است که با بررسی تعداد نسخه ژنی ، حذف ها و دوتاشدگی ها  (deletion & duplication) و حتی جهش های نقطه ای در تشخیص سریع و دقیق طیف وسیعی از بیماری های ژنتیکی کاربرد دارد. در این تکنیک که مبتنی بر اتصال هر جفت پروب اختصاصی به توالی مشخصی در ژنوم است ، امکان بررسی همزمان 50 قطعه مختلف نوکلئوتیدی در یک واکنش وجود دارد. امروزه این تکنیک برای تشخیص سریع بیماریهای ژنتیکی قبل از تولد کاربرد وسیعی دارد.

تکنیک MLPA

اساس روش MLPA بر پایه هیبرید شدن به صورت اختصاصی می باشد، به طوری که حتی تغییر یک نوکلئوتید در محل اتصال ۲ پروب قابل شناسایی است. با استفاده از مجموعه ای از پروب ها که هر کدام شامل دوالیگونوکلئوتید و مکمل ناحیه مشخصی از ژنوم می باشند، تعداد نسخه ژنی در 40تا 50 محل مختلف را می توان در یک واکنش ساده PCR مشخص نمود. امروزه  MLPA در زمینه های مختلفی مانند شناسایی سرطان ها، تشخیص ناقلین و افراد مبتلا به بیماری های ژنتیک ، به خصوص  آلفا تالاسمی، بتا تالاسمی و دیستروفی عضلانی دوشن و... به کار می رود. این تکنیک برای تشخیص سریع بیماری های ژنتیکی قبل از تولد مانند سندرم داون ، تریزومی ١٨ یا تریزومی ١٣ و سایر ناهنجاری های کروموزومی بر روی نمونه های آمنیوسنتز و یا پرزهای جفتی (CVS) کاربرد وسیعی دارد.

 در شرایطی که زمان برای ختم بارداری واقعاً محدود باشد، به وسیله تکنیک های MLPA و QFPCR این امکان وجود دارد تا در مدت یک روز وضعیت جنین از نظر ناهنجاری های شایع کروموزومی بررسی شود.

مزایای استفاده از  MLPA

1. در یک واکنش PCR امکان بررسی همزمان 50 محل مختلف ژنومی

2. نیاز به میزان کم DNA

3. سرعت جوابدهی بالا

4. هزینه بسیار مناسب

5. به علت اختصاصی بودن بالا، دارای دقت بالا

6. استفاده از یک جفت پرایمر

 

کاربرد روش MLPA

1.  بررسی del/dup در ژنوم

2.  بررسی تعداد نسخه ژنی جهت screening

3.  بررسی جهش های نقطه ای و پلی مورفیسم های (SNP’s)

4. بررسی وضعیت متیلاسیون مناطق پروموتری و یا imprinted

5. تشخیص آنیوپلوئیدی

 

مزیت روش MLPA نسبت به دیگر روش ها

1. به وسیله این تکنیک می توان تعداد نسخه ژنی (deletion,duplication) را به راحتی و سریع مشخص کرد، در صورتیکه  Real-time PCR دارای حساسیت کم برای تغییرات کوچک است و باید محل  حذف و یا اضافه شدگی ها مشخص باشد.

2. برای تشخیص جهش های نقطه ای که از روش های تعیین توالی مانند SSCP ، DHPLCو... استفاده می شود، این تکنیک ها قادربه شناسایی تغییرات تعداد نسخه ژنی در حد یک اگزون کامل نیستند.

3. تکنیک FISH قادر به تشخیص جهش های کوچک نمی باشد.

4.  Southern blots تنها قادربه تشخیص حذف های تا چند کیلو باز است که نیازمند به مقدار DNA با غلظت ومیزان بالا و پروب های رادیو اکتیو که بسیار زمان بر و پر هزینه است .