هزینه آزمایش : 11,280,000 ریال

توضیح روش کار :

آزمایش بررسی جهش در دومین تیروزین کینازی BCR-ABL

نوع نمونه :

نمونه خون EDTA

نمونه مغز استخوان

حجم نمونه :

5 ml نمونه خون EDTA

2 ml نمونه مغز استخوان

نگهداری نمونه :

5 روز در دمای 2-8 درجه

حمل و نقل نمونه :

انتقال در شرایط یخچالی

راهنمای جمع آوری نمونه :

نمونه فریز دفریز نشود

اطلاعات لازم از بیمار :

سن بیمار- سابقه بیماری- مصرف دارو

آمادگی لازم قبل از نمونه گیری :

نیاز به آمادگی خاصی ندارد.

اطلاعات بالینی :

 این آزمایش به بررسی وجود جهش در دومین تیروزین کینازی ژن BCR-ABL می پردازد.  بیماری (Chronic Myeloid Leukemia (CML یک نوع سرطان خون مزمن است که در اثر تکثیر بی رویه سلول های پیش ساز خون ایجاد می شود. وجود کروموزوم فیلادلفیا که در اثر جابجایی متعادل کروموزوم های ۹ و ۲۲ ایجاد می شود ویژگی اصلی این بیماری می باشد. در اثر این جابجایی پروتئین تیروزین کیناز BCR-ABL تولید می شود که دارای فعالیت تیروزین کینازی پایدار بوده و منجر به بروز خصوصیات توموری در سلول می گردد.

با توجه به نقش این پروتئین در ایجاد بیماری CML درمان های اختصاصی با هدف از بین بردن اثر این پروتئین طراحی و ساخته شده است. داروی Imatinib به عنوان درمان اولیه و مهم بیماری CML می باشد که با اتصال به پروتئین BCR-ABL باعث مهار عملکرد آن می شود. بعضی از بیماران مبتلا به CML به این درمان پاسخ فعال نمی دهند و یا علائمی دال بر کاهش پاسخ به درمان نشان می دهند.

عدم پاسخ دهی و یا مقاومت به درمان با داروی Imatinib در اثر ایجاد جهش در دومین کینازی ژن BCR-ABL رخ می دهد. همچنین افراد دارای این جهش ها پیش آگهی بدتر و خطر پیشرفت بالاتری را نسبت به دیگر افراد نشان می دهند. در نتیجه بررسی جهش های این ژن در تعیین پیش آگهی بیمار و انتخاب درمان دارای اهمیت می باشد. با توجه به این که وجود بعضی جهش ها در دومین تیروزین کیناز ژن BCR-ABL موجب مقاومت دارویی نسبت به داروهای مهار کننده تیروزین کیناز می گردد و همچنین در ارتباط با پروگنوز بیماری است، در نتیجه بررسی این جهش ها در تعیین وضعیت بیمار و انتخاب نوع درمان کمک کننده می باشد. پزشکان بر اساس نتایج این آزمایش تصمیم به افزایش میزان دوز داروی imatinib  و یا تغییر این دارو به نوع دیگری از داروهای مهارکننده تیروزین کیناز می گیرند.این آزمایش برای بیماران مبتلا به CML و یا ALL (Ph positive) که عدم پاسخ به درمان به imatinib را نشان داده و یا دچار عود بیماری شده اند، انجام می شود.

تفسیر نتایج: 

نتیجه مثبت (positive): به این مفهوم است که بیمار دارای جهش در نقطه مورد بررسی در ژن BCR-ABL می باشد و مقاومت دارویی او می تواند به علت وجود این جهش باشد.

نتیجه منفی (negative): به این مفهوم است که بیمار فاقد جهش در نقطه مورد بررسی ژن BCR-ABL می باشد.

نام روش اندازه گیری :

تکثیرmRNA ژن BCR-ABL توسط RT-PCR و در ادامه تکثیر توسط nested PCR صورت گرفته و سپس شناسایی جهش های نقطه ای در کدون های221 تا 500 دومین کیناز ABL1 محصولات PCR توسط توالی یابی مستقیم صورت می گیرد.

نام های مشابه :

BCR/ABL bcr-abl Oncogene Philadelphia Chromosome BCR-ABL1 Fusion

نیازهای همراه نمونه :

نام-نام خانوادگی-نوع نمونه

عوامل مداخله گر :

هپارین در مقادیر بالا در این آزمایش تداخل ایجاد می کند.

نمونه گیری، جداسازی بافی کت و انجام سایر مراحل آزمایش در شرایط غیر استریل می تواند منجر به ایجاد نتایج مثبت کاذب گردد.

برای جلوگیری از ایجاد نتایج مثبت کاذب باید فضاهای مربوط به استخراج RNA، آماده سازی مواد مورد نیاز واکنش و فضای افزودن نمونه DNA به لوله PCR از هم جدا باشند.

موارد عدم پذیرش نمونه :

جمع آوری نمونه ها در شرایط غیر استریل.

سرم، نمونه های فریز شده، نمونه های منعقد شده یا به شدت همولیز شده.

نمونه های جمع آوری شده در ظروف حاوی مواد ضد انعقاد غیر از EDTA (هپارین با غلظت بیش از 10 واحد در میلی لیتر سبب مهار PCR می شود لذا، از نمونه های هپارینه و نیز نمونه بیماران تحت درمان با هپارین نمی توان استفاده کرد).